Nr. 2 Agenți cauzali pentru Salmonella. Taxonomie. Caracteristică. Diagnosticul microbiologic al salmonelozei. Tratament.
Infecție zoonotică intestinală acută cauzată de serovariile Salmonella, caracterizată prin leziuni ale tractului gastrointestinal.
Proprietăți morfologice: mobile, bețișoare gram „-”, fără capsule. Ele cresc bine pe medii nutritive simple și care conțin bilă. Pe dens - formează colonii în Formele R și S, pe lichid - turbiditate. Pe mediile care conțin lactoză formează colonii incolore.
Activitate biochimica: glitch fermentație. la acid și gaz, fără fermentație de lactoză, producție de hidrogen sulfurat, fără formare de indol.
Structura antigenică: antigen O somatic, antigen H flagelar, Unele - antigen K. Gen Salmonella constă din două tipuri - tip S.enterica, care include toate Salmonella care sunt agenți patogeni ai oamenilor și animalelor cu sânge cald și speciile S.bongori, care se subîmparte în 10 serovare.
Vedere S.entericaîmpărțit în 6 subspecii, care sunt subîmpărțite în serovare. Unele serovare de Salmonella, în special S. typhi, au un antigen polizaharidic Vi, care este un tip de antigen K.
Epidemiologie. Agenții cauzali ai salmonelozei sunt un grup mare de Salmonella, care face parte din subspecie enterica. Cei mai frecventi agenți cauzali ai salmonelozei la om sunt serovarele S. Typhimurium, S. Dublin, S. Choleraesuis. Principalii factori de transmitere sunt carnea, laptele, ouăle, apa.
Patogenie și clinică. Boala evoluează într-o formă locală de gastroenterită, sindromul principal este diareea. După ce au invadat mucoasa intestinului subțire prin celulele M și pătrunzând în submucoasă, Salmonella sunt captate de macrofage, fiind transferate de acestea în plasturii lui Peyer, unde formează focarul primar al infecției. În acest caz, se eliberează endotoxina și enterotoxina proteică. Enterotoxina activează intrarea în lumenul intestinal un numar mare lichide, K, Na. Diaree, vărsături.
Imunitate: nestresată, specifică serovarului, mediată de IgA secretorie, care împiedică Salmonella să pătrundă în mucoasa intestinală subțire. Anticorpii pot fi detectați în sânge.
Diagnosticul microbiologic. Examenul bacteriologic este supus la vărsături, lavaj gastric, fecale, bilă, urină, sânge. La identificarea culturilor izolate, este necesară o gamă largă de seruri O și H de diagnosticare.
Pentru studiile serologice se folosesc RNGA, ELISA. O valoare diagnostică importantă este creșterea titrului de anticorpi în dinamica bolii.
Tratament. Se utilizează terapia patogenetică, care vizează normalizarea metabolismului apă-sare. În forme generalizate – antibioticoterapia etiotropă.
Grupa Salmonella, seruri adsorbite O- și H-aglutinante. Sunt utilizate pentru stabilirea serogrupurilor și serovariilor de Salmonella în reacția de aglutinare.
Salmonella O- și H-monodiagnosticums sunt suspensii de Salmonella distruse prin încălzire (O-diagnosticum) sau tratament cu formol (H-diagnosticum). Sunt utilizate pentru serodiagnosticul febrei tifoide.
Prevenirea . Prevenirea specifică a salmonelozei la animalele agricole și păsările. Prevenire nespecifică - realizarea măsurilor sanitare veterinare.

Genul Salmonella reunește peste 2000 de reprezentanți, larg răspândiți în natură. Ele provoacă boli la oameni și animale. Genul Salmonella include agenții cauzali ai febrei tifoide, paratifoidei A și B și a toxiinfecțiilor alimentare.

Agentul cauzal al febrei tifoide(S. typhi) a fost descoperit pentru prima dată în 1880 de Ebert în organele oamenilor care au murit de febră tifoidă. În 1884, Gaffki a izolat o cultură pură a microbilor. Mai târziu, în 1896, Ashar și Bansod au găsit în puroiul și urina pacienților care aveau un tablou clinic de febră tifoidă, tije care diferă ca proprietăți biochimice și serologice de agentul cauzal al febrei tifoide. Au fost numiți paratifoizi - S. paratyphi A și S. paratyphi B. Dintre agenții cauzatori ai intoxicațiilor alimentare, primul a fost descoperit în 1885 de către Somon, agentul cauzator al holerei porcine - S. cholerae suis. În 1888, Gertner a izolat S. enteritidis în timpul unui focar de otrăvire alimentară după ce a mâncat carnea unei vaci bolnave. Mai târziu, a fost descris tifosul murin Salmonella - S. typhimurium și alți microbi, care erau similari între ei în mai multe moduri și uniți în genul Salmonella, numit după Somon.

Morfologie și proprietăți biologice. Salmonella sunt tije scurte cu capete rotunjite, având o dimensiune medie de 1-3 microni. Toate sunt mobile datorită prezenței flagelilor peritric. Sporii și capsulele nu se formează. Se colorează bine cu coloranți cu anilină și sunt gram-negativi. Aerobi facultativi. Ele cresc bine pe medii nutritive simple la o temperatură de 20-40°C și un pH de 5,0 până la 8,0, cu un optim de 37°C și un pH de 7,2-7,4. Mediile Pa lichide dau turbiditate uniformă. Pe agar carne-peptonă, coloniile sunt mai mici decât cele de Escherichia coli, fragede, translucide. Pe mediile de diagnostic diferenţial ale Endo, Levin, Ploskirev, coloniile sunt mici, incolore. Colonii negre pe agar sulfit de bismut.

Proprietățile enzimatice ale Salmonella (vezi Tabelul 3) sunt destul de constante: nu descompun lactoza și zaharoza, fermentează glucoza și manitolul cu formarea de acid și gaz, deși există tipuri care le fermentează doar la acid (de exemplu, Salmonella). tifoidă). Majoritatea Salmonella descompune proteinele cu formarea de hidrogen sulfurat, nu formează indol și nu lichefiază gelatina. Salmonella conține endotoxină lipopolizaharidă-proteică. Este rezistent la căldură, are proprietăți antigenice.

Durabilitate. Salmonella este stabilă în mediu. În praf, în gheață, în apă curată, rămân până la 3 luni. La o temperatură de 70°C mor în 5-10 minute, la 10°C - instantaneu. Salmonella rămâne viabilă în carnea sărată și afumată timp de 27,2 luni. Se pot înmulți în lapte. Sub influența unei soluții de 1% de sublimat, soluția de 3-5% de acid carbolic și cloramină mor în câteva minute.

Structura și clasificarea antigenică. Salmonella conține două complexe antigenice principale: O-somatic și H-flagelat. O-antigenul este un complex lipopolizaharid-protein, termostabil, inactivat de formol, corespunde endotoxinei unei celule bacteriene. Antigen H de natură proteică, termolabil, ușor distrus de alcool și fenol. Rezistent la formol. Producția de H-diagiosticums se bazează pe această proprietate. Antigenele O și H din diferiți reprezentanți ai Salmonella sunt eterogene, ceea ce a stat la baza clasificării acestor bacterii dezvoltate de Kaufman și White (Tabelul 4).

Ei au împărțit toate Salmonella cu antigene O în grupuri: A, B, C, D, E etc. Fiecare grup este caracterizat de prezența unui antigen O specific (de exemplu, în grupul B este „4”). Unele grupuri au antigene O comune (de exemplu, grupa A, B și D - "1, 12"). Salmonella tifoidă conține antigenul Vi, care este mai superficial decât antigenul O și poate preveni aglutinarea cu serul O. Pierderea acestuia duce la restabilirea O-aglutinarii. Antigenul Vi este ușor distrus prin fierberea culturii timp de 10 minute, prin adăugarea de fenol în mediu sau prin creșterea microbilor pe medii artificiale.

În antigenele Salmonella H se disting fazele I și II. Prima fază a antigenelor H este diferită pentru serotipurile aparținând aceluiași grup (de exemplu, în grupul S. paratyphi B - "c", și Salm. typhimurium - "i"). Această separare ajută la diferențierea tipurilor individuale de Salmonella în reacția de aglutinare pe sticlă cu serul de Salmonella monoreceptor. În reacția de aglutinare în timpul interacțiunii antigenelor H cu anticorpii corespunzători apare o aglutinare grosieră H; O- și Vi-aglutinarea este cu granulație fină.

În plus față de tiparea serologică a Salmonella, tipurile de fagi sunt uneori determinate folosind bacteriofagi specifici Salmonella, dintre care mai mult de 100 sunt cunoscute până în prezent. Tipurile de fagi Salmonella sunt stabile. Tiparea fagilor Salmonella este utilizată pentru analiza epidemiologică pentru a identifica sursa infecției.

Patogenitate. Printre Salmonella există tipuri care sunt patogene doar pentru om: Salmonella tifoidă, paratifoidă A și B. Există tipuri care provoacă boli doar la animale. Majoritatea sunt patogene atât pentru oameni, cât și pentru animale. Varietatea formelor clinice de boli cauzate de salmonella depinde de proprietățile agentului patogen, de masivitatea infecției, de starea forțelor de protecție ale macroorganismului și de alte motive.

Identificarea Salmonella

După 18-20 de ore de incubare a plăcilor cu medii de diagnostic diferențial (agar bismut-sulfit timp de 48 de ore), natura creșterii se înregistrează prin selectarea a 3-5 colonii suspecte pe unul dintre mediile de identificare primară (Kligler, Ressel). , Olkenitsky) și pe un agar nutritiv înclinat. În cazul unei situații epidemice de urgență, cultura crescută pe aceste medii este utilizată pentru stabilirea ulterioară a reacției de aglutinare. Rezultatele acestei reacții sunt orientative și necesită confirmare în etapa de finalizare a identificării biochimice.

proprietăți culturale

Caracteristicile comune ale morfologiei și o serie de proprietăți culturale ale bacteriilor din genul Salmonella nu permite ca acestea să fie tipificate în funcție de caracteristicile indicate. Pentru aceasta, pe lângă morfologie și proprietăți culturale, se studiază proprietățile enzimatice și structura antigenică, în unele cazuri se pune o probă biologică pe animale de laborator.

Proprietățile enzimatice ale bacteriilor se datorează unui set de enzime, reflectă anumite condiții de nutriție și metabolism inerente în această specie microorganisme în anumite condiții de mediu. Bacteriile din genul Salmonella se caracterizează prin următoarele proprietăți enzimatice: nu lichefiază gelatina, nu descompun adonitul și nu fermentează zaharoza; marea majoritate nu descompune salicina și nu descompune lactoza, nu formează indol, nu descompune ureea, nu dă reacția Voges-Proskauer (reacție la acetilmetilcarbinol); fermentează (cu câteva excepții maltoza, manitolul, sorbitolul, descompune glucoza cu formarea de gaze (S. typhi, S. pullorum de obicei nu formează gaz); dă o reacție pozitivă cu roșu de metil, utilizează amoniu și reduce nitrații; majoritatea dintre ele produc hidrogen sulfurat.

Pentru a studia proprietățile enzimatice ale bacteriilor din genul Salmonella, se utilizează de obicei o serie scurtă colorată (pestriță), constând din medii cu glucoză, manitol, arabinoză, dulcit, ramnoză (mediul lui Bitter); bulion glicerin fuchsin (bulion Stern). Pe lângă aceste medii, pentru diferențierea tipurilor serologice de Salmonella se mai folosesc medii cu maltoză, inozitol, trehaloză, xiloză; lapte de turnesol (modificarea laptelui de turnesol în timpul creșterii salmonelei le permite să fie diferențiate prin capacitatea lor de a forma acid sau alcali). În loc de turnesol, puteți folosi lapte degresat cu indicator albastru de bromtimol (1 ml de soluție 0,4% în 100 ml de lapte). Formarea hidrogenului sulfurat prin cultură este de importanță cunoscută pentru diferențierea Salmonella. Proprietățile proteolitice sunt studiate prin inocularea culturii studiate de Salmonella pe NRM și lapte.

Datorită asemănării bacteriilor din genul Salmonella cu alte microorganisme din familia Enterobacteriaceae, devine necesară diferențierea acestora. În prezent, mediile nutritive dense de diagnostic diferențial cu lactoză (medii Ploskirev, Endo, Levin) sunt utilizate pe scară largă în practica bacteriologică. În funcție de capacitatea bacteriilor de a fermenta lactoza, Salmonella se distinge de E. coli adesea concomitentă, prin urmare, atunci când se examinează materialul pentru Salmonella, acestea sunt mai întâi însămânțate pe unul dintre mediile de diagnostic diferențial. Pe aceste medii, E. coli care fermentează lactoza cu formarea de acid și o schimbare a culorii indicatorului formează colonii care diferă ca culoare de coloniile de Salmonella care nu fermentează lactoza. Pe mediul Endo, bacteriile E. coli dau colonii roșii, adesea cu un luciu metalic, Salmonella sunt incolore sau roz pal (colorate în culoarea mediului); pe mediul lui Ploskirev E. coli - colonii roșii portocalii, salmonella - transparent sau roz pal; pe mediul Levin, E. coli formează colonii negre înconjurate de o margine, salmonella - transparentă, roz pal sau roz-violet. Pentru diferențierea Salmonella și a tulpinilor similare din punct de vedere cultural, precum și a bacteriilor din genul Proteus și a bacteriilor din grupul Escherichia coli, medii uree (Preis, Ressel, mediu Olkenitsky), SS-agar (Salmonella - Shigella - agar) etc. Culoarea acestor medii se datorează intensității inegale de scindare a substanțelor azotate de către microorganisme cu formarea de produse alcaline. Bacteriile din grupul Escherichia coli și Proteus (cu excepția formei 0), de regulă, nu cresc pe SS-agape, iar Salmonella crește sub formă de colonii delicate, incolore.

Mediile dense de diagnostic diferențial servesc doar pentru a determina apartenența bacteriilor la genul Salmonella și pentru a le separa de microflora însoțitoare.

Proprietățile enzimatice ale Salmonella nu sunt întotdeauna stabile și se pot schimba în funcție de condițiile de mediu, prin urmare, tipizarea corectă a Salmonella este posibilă doar ca urmare a studierii unui complex de proprietăți morfologice, culturale, enzimatice și structurii antigenice.

Mediu de magneziu Rappaport-Vassiliadis, 500 g/pachet, Nr. Cat. 107700
- SalmonellaîmbogăţirefrateRAPPAPORT- Magneziu Rappaport mediu, 500 g/pachet, Cat. Nr. 110236
- Bulion de îmbogățire cu tetrationat Muller-Kauffman- bulion tetrationat, 500 g/pachet, Cat. Nr. 110863
- Muller- KauffmannTetrationat- NovobiocinăFrate (MKTTn) - bulion tetrationat cu novobiocin, 500 g/pachet, Cat. Nr. 105878
- BismutsulfatagarWILSON- BLAIR- Agar bismut sulfit, 500 g/buc, Cat. Nr. 105418
- Hektoenentericagar- Agar hectoen, 500 g/pachet, Cat. Nr. 111681
- SS- agar- Salmonella-Shigella Agar, 500 g/pachet, Cat. Nr. 107667
- BPLS (Sclipitor- verdeFenol- roșulactozăZaharozaagar) - Agar lactoză zaharoză cu verde strălucitor și roșu fenol, 500 g/pachet, Nr. Cat. 107232
- XLD-agar- Agar xiloză-lizin-deoxicolat pentru izolarea și diferențierea enterobacteriilor patogene, 500 g/pachet, Cat. Nr. 105287
- Agar XLT4- Xiloză-Lizină cu Tergitol 4 (inhibă complet creșterea Proteus), 500 g/pachet, Cat. Nr. 113919
- Supliment XLT4- Supliment selectiv pentru mediu agar XLT4, 100 ml/buc, Cat. Nr. 108981
- Agar Rambach- Agar Rambach cromogen pentru salmonella pentru 250 def., 4 flacoane x 250 ml, Cat. Nr. 107500
- MSRV (Rappaport-Vassiliadis semisolid modificat)- Mediu semi-lichid pentru izolarea accelerată a Salmonelei din produse și materii prime, 500 g/pachet, Cat. Nr. 109878
- Supliment selectiv MSRV- Supliment selectiv (Novobiocin, 10 mg) pentru mediu MSRV, 10 fiole/buc, Cat. Nr. 109874
- Baza de bulion Salmosyst- Îmbogățire neselectivă, 500 g/buc, Cat. Nr. 110153
- Salmosyst comprimate selective- Îmbogățirea selectivă a Salmonella - mediu tetrationat în tablete, 250 tab./buc, Cat. Nr. 110141
- Agar KLIGLER- Agar Kligler, 500 g/l, Cat. Nr. 103913
- Agar cu trei zahăr și fier- Three Sugar Iron Agar, 500 g/buc, Cat. Nr. 103915
- Agar lizină cu fier- Agar lizină cu fier pentru diferențierea și identificarea enterobacteriilor; determinarea lizin decarboxilazei și hidrogen sulfurat, 500 g/buc, Cat. Nr. 111640
- Agar citrat SIMMONS- Agar citrat Simmons pentru identificare, 500 g/l, Cat. Nr. 102501
- Salmonella cu cale unică- Test rapid (20 min) pentru salmonella, 25 teste/buc, Cat. Nr. 104140

Salmonella (Salmonellaspp.)
Genul Salmonella aparține familiei Enterobacteriaceae. Bacteriile sunt în formă de bastonaș, gram-negative, asporogene, predominant mobile. Salmonella este unul dintre cei mai răspândiți agenți patogeni de origine alimentară la nivel mondial, infectând majoritatea alimentelor crude (de exemplu carne, ouă, alimente vegetale). Rezistența la uscare a bacteriilor, combinată cu rezistența lor ridicată la căldură, pune problema protecției agenților patogeni pentru majoritatea alimentelor uscate și semi-uscate. Conform legislației alimentare a majorității țărilor, conținutul de salmonella nu este permis în 25 g de alimente. Pentru a obține un răspuns simplu (da/nu) despre prezența Salmonelei în alimente și furaje folosind metode microbiologice tradiționale, este nevoie de un total de până la 5 zile. Pentru produsele care trebuie implementate rapid, aceasta înseamnă o întârziere semnificativă. Pentru a satisface cerințele producătorilor de alimente pentru vânzarea rapidă a produselor finite și pentru a reduce costurile de depozitare, este necesar să se utilizeze metode inovatoare accelerate pentru detectarea Salmonella. Astfel, metodele accelerate de analiză a Salmonelei prezintă un interes din ce în ce mai mare. Testele rapide oferite în aceste scopuri ar trebui să fie specifice, sensibile, convenabile și rentabile. În funcție de numărul de probe studiate și de cerințele pentru specificul metodei, alegerea poate fi făcută fie în favoarea analizei moleculare a ADN-ului bacterian prin PCR (de obicei pentru un laborator cu randament ridicat), fie în favoarea testelor de imunodiagnostic ( când se analizează un număr mai mic de probe).

salmoneloza
Majoritatea persoanelor infectate cu Salmonella dezvoltă diaree, febră și dureri abdominale la 12 până la 72 de ore după infectare. Boala durează de obicei 4-7 zile și majoritatea pacienților se recuperează fără tratament. Cu toate acestea, în unele cazuri, boala poate fi atât de gravă încât este necesară spitalizarea. La acești pacienți, infecția cu Salmonella se poate răspândi din intestine în sânge și în alte părți ale corpului. Dacă pacientul nu este tratat prompt cu antibiotice, acest lucru poate duce la moarte. Bătrânii, sugarii și cei cu sistemul imunitar compromis vor fi primii afectați de cea mai gravă formă a bolii.

patogenitate
Salmonella se numără printre cei mai periculoși agenți patogeni ai infecțiilor intestinale la oameni și animalele de fermă. Potrivit OMS, în lume se înregistrează anual până la 1,3 miliarde de cazuri de salmoneloză, în timp ce dinamica bolii populației tinde să crească. În absența unui tratament eficient, cazurile letale la om variază de la 1-3 la 10-15%. În fiecare an, în Statele Unite, boala este înregistrată la 1,4 milioane de oameni, iar costurile materiale asociate cu consecințele și prevenirea bolii sunt estimate la 1-2,3 miliarde de dolari.În Rusia, această boală ocupă locul al doilea în structura acute. infectii intestinale.

Taxonomie
Gen Salmonella, numărând peste 2500 de serovarii (serotipuri), este membru al familiei Enterobacteriaceae (enterobacterii). Conform clasificării moderne bazate pe analiza ADN-ului, genul Salmonella include specia S. enterica, patogenă pentru oameni și animale cu sânge cald. Această specie este împărțită în 6 subspecii. Subspecia S. enterica subsp. Enteritidis este agentul cauzal al intoxicațiilor alimentare. Subspecia S. enterica subsp. Typhi, S. enterica subsp. Paratyphi A, B - agenți cauzali la oameni ai febrei tifoide, paratifoidei A și B.

Morfologie
Celulele de Salmonella sunt mobile (datorită flagelilor), baghete drepte gram-negative asporogene (0,5-1x1-3 microni) cu capete rotunjite. Există, de asemenea, indivizi imobili și tulpini. Nu formează capsulă, sunt chimiorganotrofe anaerobe facultative cu metabolism oxidativ și fermentativ. Ele cresc bine pe medii nutritive simple și care conțin bilă. Pe medii dense pot forma colonii în formă de R (aspre) și în formă de S (netedă), pe lichide dau turbiditate difuză. Colonii în formă de S de mărime medie, strălucitoare, translucide, cu o tentă albăstruie. La semănat sânge, cel mai bun mediu lichid de îmbogățire este bulionul de bilă, la însămânțarea biomaterialelor (fecale, bilă, urină) care conțin floră suplimentară, bulion selenit. Bacteriile formează colonii incolore pe medii diferențiale care conțin lactoză și colonii negre pe agar bismut-sulfit.

Caracterizare biochimică
Salmonella are o activitate biochimică pronunțată caracteristică genului. Pentru identificarea lor, este important să se ia în considerare următoarele proprietăți biochimice:
1) fermentația glucozei și a altor carbohidrați (manitol, maltoză) la acid și gaz (subspecie) Sf.yphi eliberează numai acid)
2) lipsa fermentației lactozei, zaharozei, salicinei și ureei,
3) reacționează cu metilrot, produce hidrogen sulfurat, indolul (de regulă) nu se formează, - oxidaza este negativă, catalaza este pozitivă, reacția Voges-Proskauer este negativă,
4) temperatura optima pentru crestere - 35-37 o C, cresterea se opreste complet la 5 o C; pH optim=7,2-7,4.

Conform clasificării serologice, marea majoritate a serotipurilor (serotipurilor) de Salmonella patogene pentru om aparțin grupelor A, B, C, D și E. Salmonella sunt tipărite conform schemei Kauffman-White în reacția de aglutinare. Pentru stabilirea acestuia se folosesc seruri hiperimune sau anticorpi monoclonali la salmonella. Diagnosticul salmonelozei și analiza epidemiologică a agenților patogeni se bazează pe serotipizare.

Surse și factori de transmitere a infecției
Salmoneloza (febra tifoidă, paratifoidă, gastroenterita, septicemie etc.) sunt boli larg răspândite de origine alimentară la animale și la oameni cu un mecanism fecal-oral de transmitere a infecției. La om, intoxicația alimentară este însoțită de leziuni ale tractului gastrointestinal și deshidratare. Doza infectantă este de la 1000 la 10 mii de celule. Habitat permanent - intestinele oamenilor și animalelor cu sânge cald, care sunt un rezervor de infecție. Produsele alimentare și materiile prime contaminate, precum și apa, sunt principalele surse și factori de transmitere ai agentului patogen. Agentul patogen trece în produsele alimentare din materii prime contaminate. Solul este implicat în calea de contact de transmitere a infecției. Prezența Salmonella în sol sau apă indică întotdeauna contaminarea acestor medii cu fecalele persoanelor și/sau animalelor infectate - păsări, vite, porci, pisici, câini, porumbei. Infecția lor cu Salmonella variază de la 6-7 la 80%.

Principalele surse de infecție
În Statele Unite, salmoneloza reprezintă aproximativ 9% din infecțiile alimentare, iar o proporție semnificativă a populației acestei țări este purtător de bacterii asimptomatici. Produsele de pasare contaminate, carnea si produsele din carne, laptele, branza, untul, legumele si fructele, semifabricatele si condimentele (maioneza, praf de ou, creme etc.) sunt principalele surse de salmoneloza. Produsele alimentare sunt, de asemenea, contaminate cu bacterii în timpul gătitului, contactului cu purtători, echipamente de producție, purtători de animale (muște, rozătoare asemănătoare șoarecilor, animale de companie). Viabilitatea Salmonella depinde de tipul de produs și de condițiile de mediu. Deci, la suprafața legumelor și fructelor, bacteriile supraviețuiesc timp de 5-10 zile, în lapte - până la 20 de zile, în bere și chefir - până la 2 luni, în cârnați, carne (inclusiv sărată), unt - de la 2 la 6 luni. , în brânzeturi - până la 1 an, în carne congelată - până la 2-3 ani.

Patogeneza
Natura diferită a bolii se explică prin multiplicitatea factorilor de patogenitate (endo-, exotoxine etc.), care încă nu sunt bine înțeleși. Toate Salmonella virulente produc endotoxină, care induce dezvoltarea febrei la persoanele infectate (cu creșterea temperaturii până la 39-40 o). După infecția orală, odată ajunsă în intestinul subțire, Salmonella invadează mucoasa intestinală și, înmulțindu-se în macrofage, formează focarul primar al infecției. La sfârșitul perioadei de incubație (10-14 zile după infectare), o dată în sânge, Salmonella provoacă bacteriemie. Agenții cauzali ai tifosului și paratifoidului sunt transportați în tot corpul cu fluxul de sânge, stabilindu-se în celulele ficatului, splinei, plămânilor, măduvei osoase și vezicii biliare. Până la sfârșitul celei de-a doua săptămâni de la debutul bolii, agentul patogen este excretat din corpul pacientului cu urină, fecale, lapte matern și saliva. Nu se formează imunitatea la boală.

Metode de detectare
Un rol important îl are prevenirea specifică a salmonelozei, care constă în realizarea măsurilor veterinar-sanitare, sanitar-igienice și antiepidemice. Prevenirea este însoțită de controlul permanent al agentului patogen din alimente, furaje, materii prime și apă.

Metoda clasică

Medii de izolare a Salmonella
- Apa cu peptonă tamponată
- Rappaport-Vassiliadis miercuri
- Mediu cu selenită
- bulion tetrationat
- Agar xiloză lizină deoxicolat
- Agar verde strălucitor
- Agar sulfit de bismut

Metoda clasică pentru studiul Salmonella folosind medii nutritive. Cu toate acestea, din cauza duratei procedurii de analiză, o metodă clasică nu este suficientă pentru a determina agentul patogen.

Express imunocromatograficteste
Pentru a accelera detectarea Salmonella, a reduce semnificativ costurile forței de muncă și a economisi resursele în ultimele decenii, au fost dezvoltate, testate și utilizate pe scară largă metode accelerate de depistare a agentului patogen. Metodele accelerate pot reduce semnificativ (cu 24-48 de ore) durata studiilor. Cu o sensibilitate ridicată, acestea asigură detectarea fiabilă a Salmonelei în materialul analizat.

Documente normative
- MP 24 FC 976 Metode de detectare a microorganismelor patogene folosind teste rapide imunocromatografice fabricate de Merck (Germania)
- GOST R 50455-92. Carne și produse din carne. Detectarea Salmonella (metoda de arbitrare)
- GOST R 52814-2007 (ISO 6579:2002). Produse alimentare. Metoda de detectare a bacteriilor din genul Salmonella.
- GOST R 53665-2009. Carne de pasăre, subproduse și semifabricate din carne de pasăre. Metoda de detectare a Salmonella;
- SP 3.1.7.2616-10. Reguli sanitare și epidemice. Prevenirea salmonelozei. Moscova: Rospotrebnadzor. 2010.18 str.

Peste 2.000 de bacterii diferite care cauzează boli la oameni și animale aparțin acestui gen din familia Enterobacteriaceae. Aceste boli se numesc salmoneloză. Salmonella este similară ca proprietăți morfologice, culturale și enzimatice, dar diferă în structura antigenică.

Salmonella este împărțită în monopatogene și polipatogene. Primele includ agenți cauzali ai febrei tifoide, ai paratifoidei A și ai paratifului B. Doar oamenii suferă de aceste boli. Al doilea grup include agenți patogeni care afectează oamenii și animalele.

S. typhi au fost descoperite pentru prima dată de Ebert (1880) în organele unei persoane care a murit de febră tifoidă. Ashar și Bansod (1886), în boli asemănătoare febrei tifoide, izolate din puroiul și urina pacienților cu bacterii care diferă ca proprietăți biochimice și serologice de agenții cauzatori ai febrei tifoide. Au fost numite S. paratyphi A și S. paratyphi B. Aproape simultan, omul de știință american D. Salmon (1885) a descris pentru prima dată agenții cauzatori ai holerei porcine (S. choleraesuis). Ulterior, au fost descrise multe bacterii asemănătoare, unite în genul Salmonella, numit după omul de știință care le-a descris.

Morfologie. Toate Salmonella sunt mici, bețișoare de 1,0-3,0 × 0,6-0,8 µm cu capete rotunjite. Gram-negativ. Mobil, peritric. Sporii și capsulele nu se formează.

cultivare. Salmonella sunt anaerobe facultative. Nu sunt pretențioși cu mediile nutritive. Ele cresc bine pe MPA și MPB la 37°C (de la 20 la 40°C) și la pH 7,2-7,4 (de la 5,0 la 8,0). Pe MPA formează colonii fragede, translucide, ușor convexe, strălucitoare, pe MPA - turbiditate uniformă.

În timpul semănării inițiale a materialului de la pacienți (fecale, urină, vărsături, sânge, bilă), se observă adesea o creștere lentă a Salmonella. Pentru acumularea lor, însămânțarea se realizează pe medii de îmbogățire: bulion selenit, mediu Muller, mediu Kaufman. Se mai folosesc medii elective (selective): bilă (10-20%) și medii Rappoport.

Pe mediile de diagnostic diferențial Endo, EMS, Ploskirev, Salmonella cresc sub formă de colonii incolore, deoarece nu descompun lactoza, care face parte din mediu. Pe agar bismut-sulfit, după 48 de ore formează colonii negre, lăsând o urmă după ce sunt îndepărtate cu o ansă (cu excepția Salmonella paratifoid A).

În culturile proaspăt izolate de S. paratyphi B, după incubarea în termostat timp de 18-20 ore și păstrarea la temperatura camerei timp de 1-2 zile, la periferia coloniei se formează un perete mucos.

Proprietăți enzimatice. Salmonella descompune glucoza, manitolul, maltoza cu formarea de acid și gaz. O excepție o constituie agenții cauzatori ai febrei tifoide (S. typhi), care descompun aceste zaharuri doar în acid. Salmonella nu fermentează lactoza și zaharoza. Proprietăți proteolitice: majoritatea Salmonella descompune mediile proteice cu formarea de hidrogen sulfurat (agenții cauzali ai paratifoidului A se disting prin absența acestei proprietăți). Indolul nu se formează. Gelatina nu este lichefiată.

Toxigenitate. Salmonella conține endotoxină - un complex lipopolizaharid-protein.

Structura și clasificarea antigenică. La începutul secolului al XX-lea, oamenii de știință au observat natură diferită antigeni de salmonella. Kaufman (1934), pe baza rezultatelor reacției de aglutinare a diferitelor Salmonele cu un set de seruri, a împărțit toate Salmonella în grupuri și tipuri și a propus o schemă de diagnostic pentru structura lor antigenică. În conformitate cu această schemă, Salmonella este în prezent în curs de identificare.

Salmonella conține două complexe antigenice: O și H, O-antigen - un complex lipopolizaharid-proteină; este termostabil, inactivat prin actiunea formolului. Antigenul H este asociat cu flagelii, are natură proteică; este termolabil, inactivat de alcool si fenol, dar rezistent la formol.

Toate Salmonella sunt împărțite în grupe O, fiecare dintre acestea fiind caracterizată de prezența anumitor antigene O: principalul, indicat printr-o cifră arabă (2, 4, 7, 8, 9 etc.) și altele suplimentare. comune mai multor grupe O ( 1, 12). În prezent, sunt cunoscute peste 60 de grupe O, notate cu majuscule ale alfabetului latin (A, B, C, D, E etc.).

S. typhi conține și antigenul Vi, care este localizat în celula microbiană mai superficial decât antigenul O și previne aglutinarea culturii cu ser O. Acest antigen este termolabil. Prezența sa a fost asociată cu virulența agentului patogen. Antigenul Vi este, de asemenea, conținut în celulele S. paratyphi C.

Antigenele Salmonella H au două faze. Salmonella de diferite serovariante ale aceluiași grup O au o primă fază diferită a antigenului H, care este notat cu litere mici ale alfabetului latin: a, b, c, d, eh ... u, z etc. Cea de-a doua fază a antigenului H este de obicei desemnată prin numere arabe: 1, 2, 5, 6, 7 și litere latine mici. Combinația diferitelor antigene O și H determină structura antigenică a culturilor și denumirea acestora.

LA munca practica pentru determinarea structurii antigenice a Salmonella se folosesc seruri aglutinante monoreceptoare adsorbite, care contin anticorpi la un antigen. Pune reacția de aglutinare pe sticlă și prezența aglutinarii cu anumite seruri caracterizează structura antigenică a culturii selectate. De exemplu, cultura este aglutinată cu O-ser "9" și "12" și H-ser "d"; găsiți în schemă un serovar cu o astfel de compoziție antigenică (S. typhi), puneți o reacție suplimentară cu Vi-ser

Există seturi de fagi specifici de Salmonella care lizează numai Salmonella fagului corespunzător. Pentru determinarea fagovarului culturilor de S. typhi care conțin antigenul Vi, la noi se produc 45 de fagi; pentru fagii S. paratyphi B-11; S. paratyphi A - 6 etc. Aceste studii sunt efectuate pentru a determina sursa și calea de transmitere a infecției.

Rezistenta la factorii de mediu. Salmonella este destul de rezistentă. La o temperatură de 100 ° C, ei mor instantaneu, la 60-70 ° C - în 10-15 minute. Tolerează bine temperaturile scăzute, pot fi păstrate în apă curată și gheață timp de câteva luni; in carne afumata si sarata - pana la 2 luni. Rezistent la uscare, de lunga durata in praf.

Sub acțiunea dezinfectanților, aceștia mor în câteva minute (soluție de fenol 2-5%, soluție de sublimare 1:1000, soluție de cloramină 3-10%).

Susceptibilitatea animalelor. Majoritatea salmonelei cauzează boli la oameni și la multe specii de animale și păsări (polipatogene).

Febra tifoidă, paratifoidă A și B

Sursa de infectare. O persoană bolnavă și un purtător de bacterii.

Căi de transmisie. Agenții infecțioși se transmit prin obiecte contaminate cu secreții umane, prin mâini, apă, alimente. Adesea agenții patogeni sunt transportați de muște. În funcție de căile de transmitere, se disting focarele menajere, de apă, alimentare de febră tifoidă și febră paratifoidă.

Patogeneza. Infecția are loc prin gură. Din cavitatea bucală, microorganismele intră în stomac, unde sunt parțial distruse sub influența sucului gastric și a enzimelor. Salmonella rămasă pătrunde în intestinul subțire, pătrunde în țesutul limfoid al intestinului subțire (grup de foliculi limfatici și solitari), în care se înmulțesc în perioada de incubație (10-14 zile). Până la sfârșitul acestei perioade, agenții patogeni intră în limfă și sânge (bacteremia) și se răspândesc în tot organismul. În această perioadă, ele sunt localizate în țesutul limfoid. organe interne, sistem macrofage, ficat, splină, măduvă osoasă. Salmonella se acumulează în vezica biliară, unde găsesc condiții favorabile pentru reproducere, deoarece bila este un bun teren de reproducere pentru aceste bacterii. În același timp, ele pătrund din nou în intestinul subțire și, afectând țesutul limfoid deja sensibilizat (foliculi limfatici de grup și solitari), provoacă formarea de ulcere tifoide specifice (Fig. 42).

În perioada de bacteriemie, o parte din microorganisme este distrusă, în timp ce endotoxina este eliberată și are loc intoxicația: crește temperatura, apar stare generală de rău, slăbiciune, durere de cap etc De la sfarsitul saptamanii a 2-a si inceputul saptamanii a 3-a, salmonela incepe sa fie excretata din organism cu fecale, urina, saliva etc.

Perioada de convalescență (recuperare) se caracterizează prin curățarea organismului de agentul patogen, creșterea activității fagocitare a celulelor și acumularea de anticorpi în sânge.

Cu toate acestea, în febra tifoidă și paratifoide, excreția bacteriană adesea nu se termină odată cu recuperarea pacientului - se formează un bacteriopurtător. Fenomenele inflamatorii cronice din vezica biliară contribuie la supraviețuirea Salmonelei în bilă și la excreția lor pe termen lung din organism (uneori până la câțiva ani).

Imunitate. Imunitatea post-infecțioasă este destul de tensionată și lungă. Recidivele sunt rare. În cursul bolii, se produc anticorpi: la sfârșitul primei săptămâni apar aglutinine, precipitine și alte tipuri de anticorpi. Numărul acestora crește, atingând un maxim în a 14-15-a zi de boală. Anticorpii rămân în serul de sânge al persoanei bolnave mult timp.

Activitatea fagocitelor și a altor factori de protecție celulari sunt, de asemenea, importante în formarea stării imunitare a organismului.

Prevenirea. Respectarea igienei personale și realizarea tuturor măsurilor sanitare și igienice: supravegherea surselor de alimentare cu apă, controlul produselor alimentare și al unităților de alimentație publică.

Profilaxia specifică. Un vaccin chimic care conține antigeni completi ai agenților patogeni tifoizi, paratifoizi A și B și anatoxinei tetanice (TAB „te). Există și un vaccin împotriva alcoolului tifoid îmbogățit cu antigenul Vi, a cărui introducere în scop profilactic are un efect bun. În focarul bolii, persoanelor care au fost în contact cu pacienții li se administrează un bacteriofag tifoid.

Tratament. Antibiotice: cloramfenicol, tetraciclina etc.

Intoxicație alimentară

La consumul de alimente contaminate cu Salmonella de diferite serovari (cu excepția S. typhi, S. paratyphi A și B), apar infecții toxice alimentare.

Surse de infecție. Animale și păsări bolnave de salmoneloză, sau sănătoase, în corpul cărora, fără să le facă rău, se află salmonela.

Căi de transmisie. Infecția apare la consumul de carne, produse din carne, ouă, lapte, produse lactate infectate cu salmonella. Cea mai periculoasă este utilizarea alimentelor în care au loc reproducerea și moartea Salmonella și acumularea de endotoxină.

Patogeneza. Odată ajunsă în organism prin gură, salmonella pătrunde în tractul digestiv. În același timp, o parte semnificativă a bacteriilor moare și este eliberată endotoxina, care poate pătrunde în sânge. Există simptome de afectare a tractului gastrointestinal și toxicoză generală. Boala durează nu mai mult de 4-5 zile; uneori cei care au fost bolnavi devin purtători de salmonella.

Imunitate mic de statura. În sângele pacienților și convalescenților se acumulează diverși anticorpi: aglutinine, precipitine etc. Există o mulțime de serovarii de Salmonella, iar imunitatea este specifică, adică direcționată împotriva unui singur agent patogen, astfel încât o persoană se poate îmbolnăvi din nou de salmoneloză.

Prevenirea. Control strict veterinar și sanitar constant asupra animalelor, sacrificarea și tăierea carcaselor, depozitarea și prelucrarea cărnii și a produselor din carne. Este necesar să se respecte cu strictețe regimul sanitar și igienic și igiena personală în unitățile de alimentație publică.

Profilaxia specifică. Persoanele care se află în focarele toxiinfecțiilor alimentare ar trebui să primească un bacteriofag polivalent salmonella.

Tratament. Principalul agent terapeutic este detoxifierea organismului - introducerea unei cantități mari de lichid, lavaj gastric. De asemenea, se folosesc antibiotice.

Infecția nosocomială cu Salmonella

Agentul cauzal al infecției nosocomiale cu Salmonella este cel mai adesea S. typhimurim. Există și focare „de spital” cauzate de S. heidelberg, S. derby etc. Deși proprietățile morfologice și culturale ale acestor agenți patogeni nu diferă de cele ale altor Salmonella, există unele caracteristici biologice caracteristice acestora. Deci, de exemplu, agenții patogeni ai infecțiilor nosocomiale aparțin anumitor biovaruri, sunt mai patogeni pentru șoarecii albi etc.

Surse de infecție. Mai des un bacteriopurtător, mai rar un pacient.

Căi de transmisie. Predomină contactul indirect (jucării, lenjerie, articole de îngrijire a pacientului). Mai puțin obișnuite sunt căile de transmitere prin aer și prin alimente.

Patogeneza. Boala se dezvoltă pe fondul unei slăbiri a organismului și al scăderii activității sale imunitare. Agentul patogen pătrunde în organism pe cale orală sau prin tractul respirator, ceea ce determină desfășurarea procesului patologic: disfuncție a tractului gastrointestinal cu deshidratare sau afectare a sistemului respirator, bacteriemie, complicații septice. În primul rând, copiii mici se îmbolnăvesc.

Imunitate. Este produs numai în legătură cu un serovar de Salmonella.

Prevenirea. Respectarea strictă a regimului sanitar și igienic în instituțiile medicale.

Profilaxia specifică. Dacă apare infecția nosocomială cu Salmonella, copiilor care au fost în contact cu pacientul trebuie să li se administreze un bacteriofag polivalent Salmonella.

Tratament. Simptomatic.

întrebări de testare

1. Care sunt proprietățile morfologice, culturale și enzimatice ale Salmonella?

2. Pe ce se bazează clasificarea Salmonella?

3. Ce boli sunt cauzate de salmonella?

Cercetare microbiologică

Scopul studiului: izolarea agenților patogeni și determinarea serovarului Salmonella.

Material de cercetare

2. Mișcările intestinale.

4. Conținutul duodenal.

În funcție de stadiul bolii, sunt examinate diferite materiale.

Conținutul de rozeola, măduva osoasă, sputa și materialul obținut la autopsie - bucăți de organe pot fi de asemenea supuse cercetărilor.

În cazul infecțiilor toxice, lavajul gastric, vărsăturile, reziduurile alimentare pot servi drept material de cercetare.

Indiferent de natura materialului prelevat pentru studiu, din momentul izolării culturii pure, studiul se realizează după schema generală.

Metode de cercetare de bază

1. Bacteriologic (Fig. 43).

2. Serologic.

Progresul cercetării

A doua zi de cercetare

Cupele se scot din termostat (incubare 18-24 ore) iar coloniile crescute sunt privite cu ochiul liber si cu lupa. Mai multe (5-6) colonii suspecte sunt izolate pe mediul lui Olkenitsky sau Russell. Semănatul se efectuează astfel: colonia îndepărtată se introduce cu grijă, fără a atinge marginile eprubetei, în lichidul de condensare, apoi se inoculează toată suprafața înclinată a mediului cu lovituri și se face o injecție în adâncimea coloană pentru a detecta formarea de gaz. Injecția trebuie făcută în centrul coloanei de agar.

Tuburile de testare cu culturi sunt plasate într-un termostat. Dacă materialul de testat a fost semănat pe mediul de îmbogățire, atunci după 18-24 de ore, mediul de îmbogățire este semănat pe plăci cu medii diferențiale. Cercetările ulterioare sunt efectuate conform schemei generale.

1 (În locul coloniilor îndepărtate rămâne o urmă neagră (culoarea mediului se schimbă).)

A treia zi de cercetare

Scoateți eprubete cu recolte din termostat și vedeți natura creșterii.

Mediile combinate conțin lactoză, glucoză, uneori uree și un indicator. Descompunerea glucozei are loc numai în condiții de anaerobioză. Prin urmare, suprafața înclinată a mediului nu se modifică în timpul descompunerii glucozei, iar coloana se transformă într-o culoare corespunzătoare indicatorului. Bacteriile care descompun lactoza și ureea schimbă culoarea întregului mediu.

Dacă culturile izolate fermentează lactoza sau descompun ureea, schimbând culoarea întregului mediu, atunci nu sunt Salmonella și se poate da un răspuns negativ.

O cultură care degradează doar glucoza este supusă unui studiu suplimentar: se fac frotiuri, se colorează cu Gram și la microscop. Dacă în frotiuri există baghete gram-negative, se studiază mobilitatea și proprietățile enzimatice ale acestora.

Motilitatea poate fi determinată într-o picătură suspendată sau o picătură zdrobită și prin modelul de creștere în mediu Hiss semi-lichid sau agar 0,2%. În prezența mobilității în timpul semănării prin injecție, creșterea pe mediu este difuză, mediul devine tulbure.

Pentru a detecta activitatea enzimatică, inocularea se efectuează pe medii Hiss, MPB, apă peptonă. Hârtiile indicatoare sunt coborâte (sub dop) în eprubete cu ultimul mediu pentru determinarea indolului și a hidrogenului sulfurat. Semănați și pe lapte de turnesol.

A patra zi de cercetare

Activitatea biochimică este luată în considerare în funcție de rezultatul fermentației carbohidraților și a altor medii (vezi Tabelul 33).

Notă. la - formarea acidului; kg - formarea de acid și gaz; u - alcalinizare; + prezența proprietății; - lipsa proprietatii.

După ce au determinat proprietățile morfologice, culturale și enzimatice ale culturii izolate, este necesar să se analizeze structura antigenică (Tabelul 34).

Identificarea serologică a Salmonelei începe cu un test de aglutinare pe sticlă cu O-ser polivalent A, B, C, D, E. În absența aglutinării, cultura izolată este testată cu O-ser polivalent la grupuri rare de Salmonella. În cazul unei reacții pozitive cu unul dintre seruri, cultura este testată cu fiecare ser O, care face parte din cel polivalent, pentru a determina serogrupul O. După ce s-a stabilit că cultura aparține grupului O, antigenele sale H sunt determinate cu serurile primei și apoi celei de-a doua faze (Tabelul 35).

Cultura de Salmonella tifoidă este de asemenea testată cu Vi-ser. Agenții cauzali ai febrei tifoide care conțin antigenul Vi sunt testați cu fagi Vi (există 86 dintre ei). Determinarea tipului de fag are o mare importanță epidemiologică (vezi Fig. 43).

Tehnica de tastare fagică. 1a metoda. 20-25 ml de agar se toarnă în vase Petri și se usucă cu capacele deschise într-un termostat. Fundul cupei este împărțit în sectoare. Numele fagului este scris pe fiecare sector. Se studiază o cultură în bulion de 4-6 ore deoarece conține mai mult antigen Vi. Pe suprafața agarului se aplică 8-10 picături de cultură în bulion și se frecă peste suprafața agarului cu o spatulă de sticlă. Cupele cu culturi sunt uscate cu capace deschise într-un termostat. Pe fiecare sector se aplică o picătură din fagul tipic corespunzător. După ce picăturile s-au uscat, cupele se pun într-un termostat timp de 18-24 ore.Rezultatul se ia în calcul cu ochiul liber sau cu lupa prin fundul cupei.

Prezența lizei culturii de către unul sau mai mulți fagi tipici face posibilă determinarea dacă tulpina izolată aparține unui anumit tip de fag.

a 2-a metoda. Cultura se aplică prin picurare pe mediul nutritiv. După uscarea culturii într-un termostat, pe fiecare picătură se aplică o picătură dintr-un fag tipic. Puneți un termostat.

Gradul de liză este exprimat prin sistemul cu patru încrucișări.

întrebări de testare

1. Ce material este examinat pentru infecții tifoide, paratifoide și toxice?

2. În ce perioadă a bolii se utilizează metoda de izolare a hemoculturii?

3. În ce perioadă a bolii cu febră tifoidă și febră paratifoidă se examinează fecalele și urina?

4. Pe ce medii de diagnostic diferenţial este inoculat materialul de testat?

5. Ce medii se folosesc pentru acumularea Salmonella?

6. Ce este determinat de serul monoreceptor O și ce este determinat de serul monoreceptor H?

1. Studiază conform tabelului. 32 natura creșterii Salmonella pe medii diferențiale. Uită-te la cupele profesorului cu inocularea Salmonella tifoidă pe mediul Endo, Ploskirev, agar bismut-sulfit. Schițați coloniile cu creioane colorate și arată-i profesorului.

2. Luați cultura de Salmonella, serurile O- și H-monoreptor de la profesor. Puneți reacția de aglutinare pe pahar. Luați în considerare reacția și arată-i profesorului.

Cultura izolată a dat un test de aglutinare pozitiv cu O-ser 4. Ce ser H ar trebui testat cu aglutinare dacă credeți că este o cultură de Salmonella paratifoid B?

Diagnosticul serologic al febrei tifoide și paratifoide

Reacția Vidal. Din a doua săptămână de boală, anticorpii împotriva agentului infecțios se acumulează în sângele pacienților. Pentru a le identifica, serul sanguin al pacientului este examinat în reacția de aglutinare. Culturile de Salmonella ucise - diagnosticums - sunt folosite ca antigen.

Pentru a stabili reacția Vidal, se utilizează serul pacientului, un set de truse de diagnosticare și soluție izotonică de clorură de sodiu.

Sângele (2-3 ml) din pulpa degetului sau vena cubitală este colectat într-un tub steril și livrat la laborator. În laborator, eprubeta este plasată într-un termostat timp de 20-30 de minute pentru a forma un cheag, apoi cheagul este încercuit cu o pipetă Pasteur pentru a-l separa de peretele eprubetei și plasat la rece timp de 30- 40 de minute. Serul separat este aspirat și folosit pentru a stabili o reacție de aglutinare cu diagnostice de salmonella tifoidă și paratifoidă. Pentru a obține ser, sângele poate fi centrifugat.

Când apare un proces infecțios - febră tifoidă sau febră paratifoidă - în organism sunt produși anticorpi O și H la antigenii patogeni cu același nume.

Anticorpii O apar mai întâi și dispar destul de repede. Anticorpii H persistă mult timp. Același lucru se întâmplă și cu vaccinarea, deci o reacție Vidal pozitivă cu antigene O și H indică prezența unei boli, iar o reacție doar cu antigene H poate fi atât la cei care au fost bolnavi (reacție anamnestică), cât și la cei care au fost vaccinate (vaccinare). Pe baza acestui fapt, reacția Vidal este plasată separat cu antigene O și H (diagnosticums).

Deoarece febra tifoidă clinic și febra paratifoidă A și B sunt similare, pentru a identifica natura bolii, serul pacientului este testat simultan cu diagnosticul de la salmonella tifoidă și febra paratifoidă A și B.

Reacția Vidal este utilizată pe scară largă deoarece este simplă și nu necesită condiții speciale.

Există două moduri de a configura reacția: picătură și volum (vezi capitolul 12). În practică, metoda volumetrică este folosită mai des. La stabilirea unei reacții de aglutinare liniară, numărul de rânduri trebuie să corespundă numărului de antigene (diagnosticum). Agentul cauzal al bolii este considerat a fi un microorganism, diagnosticul din care a fost aglutinat de serul pacientului. Uneori se remarcă aglutinarea de grup, deoarece agenții cauzali ai febrei tifoide și paratifoide au antigene de grup comune. În acest caz, rezultatul reacției din seria în care se notează aglutinarea într-o diluție mai mare de ser este considerat pozitiv (Tabelul 36).

Notă. În practică, reacția Vidal este pusă cu patru diagnostice: febră tifoidă „O” și „H”, și paratifoidă A și B - cu diagnostice „OH”.

Dacă aglutinarea are loc numai în diluții mici de ser - 1:100, 1:200, atunci pentru a distinge reacția în caz de boală de o vaccinare sau anamnestic, se recurge la re-stadializare a reacției de aglutinare după 5-7 zile. La un pacient, titrul de anticorpi crește, dar la un pacient vaccinat sau recuperat nu se modifică. Astfel, o creștere a titrului de anticorpi din serul sanguin servește ca indicator al bolii.

Vi-aglutininele apar în sângele pacientului ca răspuns la introducerea agenților patogeni tifoizi care posedă antigenul Vi în organism. Acestea sunt determinate din a 2-a săptămână de boală, dar titrul lor nu depășește de obicei 1:10. Detectarea anticorpilor Vi este asociată cu prezența agenților patogeni tifoizi în organism; prin urmare, determinarea acestor anticorpi are o mare importanță epidemiologică, deoarece face posibilă identificarea purtătorilor bacterieni.

Reacție de vi-hemaglutinare. Aceasta este cea mai sensibilă reacție pentru detectarea anticorpilor.

Principiul reacției este că eritrocitele umane (grupa I) sau de oaie, după un tratament special, pot adsorbi antigenul Vi pe suprafața lor și pot dobândi capacitatea de a se aglutina cu anticorpii Vi corespunzători.

Eritrocitele cu antigeni adsorbiți la suprafață se numesc erythrocyte diagnosticums.

Pentru a configura reacția de Vi-hemaglutinare, luați:

1) serul sanguin al pacientului (1-2 ml); 2) eritrocitar Salmonella Vi diagnosticum; H) Vi-ser; 4) O-ser; 5) soluție izotonică de clorură de sodiu.

Reacția se pune în eprubete de aglutinare sau în plăci de plastic cu godeuri.

Sângele este prelevat de la pacient în același mod ca și pentru reacția Vidal. Ia serul. Din ser se prepară diluții în serie de două ori, începând de la 1:10 până la 1:160.

În godeu se adaugă 0,5 ml din fiecare diluție și se adaugă 0,25 ml de diagnostic eritrocitar. Reacția se pune într-un volum de 0,75 ml.

Martorii sunt: ​​1) ser monoreceptor aglutinant standard + diagnosticum - reacția trebuie să fie pozitivă până la titrul seric; 2) diagnostic în soluție izotonică de clorură de sodiu (martor) - reacția ar trebui să fie negativă.

Conținutul godeurilor se amestecă bine, se pune într-un termostat timp de 2 ore și se lasă la temperatura camerei până a doua zi (timp de 18-24 ore).

Contabilitatea începe cu controlul. Reacția este evaluată în funcție de gradul de aglutinare diagnostică.

Rezultatele sunt luate în considerare conform sistemului cu patru cruci:

Eritrocitele sunt complet aglutinate - sediment în fundul găurii sub forma unei „umbrele”;

+++ „umbrela” este mai mică, nu toate eritrocitele au fost aglutinate;

++ „umbrela” este mică, în fundul găurii se află un sediment de eritrocite neaglutinate;

Reacția este negativă; eritrocitele nu s-au aglutinat și s-au așezat pe fundul puțului sub formă de buton.

întrebări de testare

1. În ce perioadă a bolii este diagnosticată reacția Vidal?

2. Ce ingrediente sunt necesare pentru a efectua reacția Vidal?

3. Ce diagnostice sunt utilizate pentru reacția lui Vidal?

4. Care dintre reacțiile serologice este cea mai sensibilă în diagnosticarea infecțiilor tifoide și paratifoide?

5. Ce diagnostic se folosește în formularea reacției de Vi-hemaglutinare?

6. Ce ser se folosește pentru a determina prezența antigenului Vi în cultura studiată?

7. Care este semnificația definiției tipului Vi-fag?

Luați de la profesor O- și H-diagnosticum de la salmonella tifoidă, paratifoid A și paratifoid B și serul pacientului. Pune reacția lui Vidal.

Medii nutritive

Medii EMS, Ploskirev, agar bismut-sulfit sunt produse de industria medicală sub formă de pulbere uscată. Se prepară conform instrucțiunilor de pe etichetă: se cântărește o anumită cantitate de pulbere, se toarnă cantitatea adecvată de apă, se fierbe și se toarnă în vase Petri sterile.

miercuri Russell. În 950 ml de apă distilată se adaugă 40 g de mediu nutritiv uscat și se adaugă 5 g de agar nutritiv. Se incinge la fiert si se dizolva pulberile. Se dizolvă 1 g x în 50 ml apă distilată. ore de glucoză și adăugat la amestecul preparat. Mediul este turnat în eprubete sterile de 5-7 ml, sterilizat cu abur curgător (2 zile timp de 2 minute) și teșit astfel încât să rămână o coloană. Mediul Russell cu manitol și zaharoză se prepară în același mod.

Mediul Olkenitsky din agar uscat. 2,5 g de agar nutritiv uscat se topesc în 100 ml apă distilată. Toate ingredientele indicate în rețetă (etichetă) se adaugă în agar răcit la 50 ° C. Mediul turnat în eprubete este sterilizat cu abur curgător (3 zile timp de 20 de minute) și apoi teșit. Mediul finit ar trebui să aibă o culoare roz pal.